Microscopia de fluorescenta

Microscopia de fluorescenta

Fluorescenta este proprietatea anumitor substante de a emite lumina (radiatie vizibila) atunci cand sunt excitate cu radiatie UV. Deoarece multe substante de interes medical prezinta fluorescenta (acizi nucleici, proteine) aceasta tehnica este foarte utilizata in practica de laborator si de cercetare medicala.

Fiecare substanta ce prezinta fluorescenta este caracterizata de o lungime de unda de excitatie (in UV) si de o lungime de unda de emisie (in vizibil), astfel incat tehnica poate nu doar pune in evidenta dar si identifica substantele respective. In acest scop, se utilizeaza filtre optice si de UV pentru selectarea radiatiei de excitatie si de emisie a substantei ce urmeaza a fi observata. Filtrele se dispun ca in figura 3.3.

Figura 3.3. Microscopia de fluorescenta.

In cadrul acestei tehnici, pentru observarea substantelor ce nu prezinta fluorescenta in mod direct, se utilizeaza "markeri de fluore-scenta", substante ce au urmatoarele proprietati:

In orto-statism diametrul venelor poate fi de cateva ori mai mare decat in clino-statism. Pe de alta parte, venele pot fi golite prin influ-enta gravitatiei.

In aceste conditii peretele venos permite colabarea venelor care capata aspectul unei benzi (panglici). Flexibilitatea marcata a peretilor venosi explica de ce sifonajul (suctiunea) nu poate juca un rol important in miscarea coloanei de sange.

Interiorul venelor este tapetat cu endoteliu, care ofera o suprafata non-trombogenica.

Viteza scazuta de curgere a sangelui, perioadele de staza si hipoxia relative reprezinta factori favorizanti pentru tromboza. Aceasta nu apare in mod obisnuit datorita calitatilor particulare ale endoteliului venos.

La acest nivel se produc cantitati crescute de prostaciclina care protejeaza impotriva agregarii plachetare si de plasmina care poate dizolv

- fluorescenta intrinseca

- aditivitate foarte mare

- deterioreaza minim structura (substanta) de care se fixeaza

Cele mai utilizate sunt substantele din clasa flavinelor.