Biotehnici derivate sau finalizate prin transferul de embrioni

BIOTEHNICI DERIVATE SAU FINALIZATE PRIN TRANSFERUL DE EMBRIONI

Pentru perfectionarea continua a procesului de reproductie, in ultimul timp, atat pe plan mondial cat si in tara noastra se aplica sau sunt in curs de implementare o serie de biotehnici care contribuie la ameliorarea intr-un timp alert a polulatiilor de animale si cresterea numerica a acestora, cum sunt:

Fecundatia in vitro

Bisectia embrionilor

Sexarea embrionilor

Sincronizarea estrului si ovulatiei in sezon si contrasezon

Inducerea poliovulatiei

Clonarea

Fecundatia in vitro

Este o biotehnica prin intermediul careia procesele fiziologice de maturare a gametilor femeli si de capacitare a spermatozoizilor, fecundatie si cultura a embrionilor pana la stadiul de transfer, sunt dirijate si se produc inafara organismului femel in diferite medii de cultura.

Fecundaia in vitro constituie o biotehnica ce permite studierea in vitro a interactiunilor dintre cei doi gameti sub rezerva reproducerii artificiale.

Etapele fecudatiei in vitro sunt:

-obtinera ovocitelor

-maturarea in vitro a ovocitelor

-capecitarea spermatozoizilor

-fecundarea si cultura in vitro

-transferul embrionilor rezultati

Obtinera ovocitelor  

Sursele posibile pentru ovocite sunt:

-ovocite provenite prin punctia foliculilor maturi de la femelele cu estru spontan sau sperovulat, recoltatea inainte sau dupa ovulatie;

-ovocite obtinute din foliculi imaturi, recoltate din ovarele femelelor sacrificate sau;

-ovocite rezultate din oviducte recoltate imediat dupa ovulatie;

Ovocitele mature pot fi recoltate din foliculii maturii sau din oviduct in primele 6 ore de la ovulatie, plasate intr-un mediu Krebs-Ringer si incubate la 38 grade C, umiditate relativa de 100% si 5 % atmosfera de CO

Pentru recoltatarea ovocitelor se poate folosi un endoscop, cuplat la un sistem de aspirare in vederea prelevarii lichidelor foliculilor, cu un diametru de2-6 mm.

Matrurarea in vitro a ovocitelor

Ovocitele prelevate din foliculii antrali, prin laparotomie sau sacrificarea femeleor, reiau spontan meioza daca sunt plasate intrun mediu Krebs-Ringer si incubate la 38 grade C, umiditate relativa de 100% si 5 % atmosfera de CO

Ruperea membranei nucleare se produce dupa 6-12 ore de cultura si emiterea primului globul polar dupa 24 de ore.

Capacitarea spermatozoidului

Capacitarea spermatozoidului sa obtinut prin incubarea acestora la 37 % C timp de 1-2 ore intr-un mediu cu o forta ionica crescuta ceia ce a dus la detasarea proteinelor de acoperire sau in alte medii ce contin ionoforul calcic asociate sau nu cu cafeina.

Fecundatia si cultura in vitro a embrionilor.

Fecundatia se realizeaza prin cultura timp de o zi intr-un meiu special a 0 ml spermatozoizi cu concentratie ridicata, impreuna cu ovocitele mature in atmosfera de 5% CO , 5% O , 90% N

Dupa 24 de ore de cultura impreuna cu spermatozoizii, ovocitele fecundate sunt transferate intr-un mediu special; in vederea dezvoltarii ulterioare.

Transferul embrionilor

Transferul embrionilor obtinuti in vitro se face in uterul femelelor receptoare, din aceiasi specie, a carei ciclu sexual a fost sincronizat cu varsta embrionilor obtinuti in vitro.

BIBLIOGRAFIE

Tanase Dumitru, Nacu Gherasim – Biotehnici si biotehnologii de reproductie – editura “ ION IONESCU DE LA BRAD” IASI

Ion Dinu – Tratat de cresterea suinelor – editura “ CORAL SANIVET ” BUCURESTI 2002